| 产品说明: |
| Fast Taq DNA Polymerase 是经过基因改造的可以快速扩增的DNA聚合酶。具有5'-3' DNA 聚合酶活性和5'-3' 外切核酸酶活性,无3'-5' 外切酶活性。延伸速度最快可达2 kb/s,0.2~2.5 kb PCR产物仅需30 min;扩增出的PCR产物带有A尾,可直接进行TA克隆;其热稳定性高,95℃半衰期超过40 min;可室温储存4周。
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| 产品特色: |
| ※ 省时:Fast Taq DNA聚合酶延伸速度最快可达2 kb/s,0.2~2.5 kb目的产物扩增仅需30 min; |
| ※ 高效:扩增速度快的同时,扩增产物的量也很高; |
| ※ 稳定:反复冻融数十次,室温放置4周后,扩增性能不受影响。 |
| 应用范围: |
| ※ 常规PCR鉴定; |
| ※ 小片段目标基因克隆; |
| ※ 平端PCR产物加A。 |
| 实验例证: |
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目的基因:人DNA的目标基因
泳道:1,3,5;泳道:Fast Taq;2,4.6泳道:Fast Pfu;
M:Fermentas SM0403 |
目的基因:人DNA的目标基因 泳道:1、3、5、7 -20℃取出;2、4、6、8 (RT)常温放置4周;1、2、5、6
Fast Taq; 3、4、7、8 Fast Pfu; M:生兴生物 SN124 100 bp DNA Ladder |
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| 以上两反应PCR反应体系: |
| 组份 |
体积 |
| 10×PCR反应缓冲液(含Mg2+) |
5 μl |
| dNTP Mix (2.5 mM each) |
4 μl |
| 引物1 (10 μM) |
1 μl |
| 引物2 (10 μM) |
1 μl |
| 模板DNA |
500 ng |
| Fast Taq DNA聚合酶 |
2.5 U |
| ddH2O |
至50 μl |
热循环扩增条件:95℃ 2 min;95℃ 1 s,60℃ 1 s,72℃ 1 s;30 cycles;72℃ 10 s。
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| 产品信息: |
| ※ 浓度:5 U/μl。 |
| ※ 活性定义:1单位(U)Fast Taq DNA Polymerase 活性定义为在74℃、30 min内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。 |
| ※ 50 mM Tris-HCl (pH 8.2); 0.1 mM EDTA; 0.1% (v/v) Tween 20; 0.1% (v/v) NP-40; 1 mM
DTT and 50% (v/v) glycerol。 |
| 产品组分: |
| 组份 |
包装 |
| Fast Taq DNA Polymerase |
5 U/μl |
| 10×Fast Taq Buffer(含Mg2+) |
1 ml |
| dNTP Mix |
0.25~1.5 ml(2.5 mM) |
| 6×Loading buffer |
1 ml |
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| 质量控制: |
| SDS-PAGE检测纯度大于99﹪,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放4周,无明显活性改变。 |
| 储存条件: |
| -20℃, 保存1年。 |
| 主要技术参数 |
| Fast Taq DNA聚合酶在扩增过程中的延伸速度为2 kb/s;最佳温度为55~65℃;dNTP的工作浓度为100~300 μM,最佳Mg2+浓度为2~3 mM,最佳pH为8.1~9.1。 |